凍干外泌體促進血管生成
血管生成為修復組織提供氧氣并提供營養。血管內皮細胞的增殖是其重要組成部分。此外,它還需要與血管生成、內皮細胞和周圍的細胞外基質環境相互作用。
創面對血管內皮細胞具有趨化作用,使內皮細胞穿透血管基底膜,進入細胞外基質,形成管腔樣結構并不斷延伸、分支,最終生成新的血管網。在此過程中,人間充質干細胞和內皮細胞來源的外泌體可增加創面新生血管的密度,這與促進內皮細胞增殖和遷移有關。
外泌體在凍干機需要選擇的保護劑,糖類保護劑有海藻糖(4% - 50mM)、山梨糖醇(10%)、蔗糖、甘露醇等;氨基酸包括谷氨酸、精氨酸、甘氨酸等(0.01M - 0.5M);血清成分如1%胎牛血清(FBS)可有效避免冷凍休克;脂質體方面,部分提出在復蘇液中添加脂質體(1% - 20%),用于破損囊泡膜的修復。
復合保護劑配方比單一保護劑更有效,如甘露醇+山梨醇(1% - 10% + 3% - 15%);海藻糖與外泌體膜脂雙分子層結合,防止低溫導致的脂質重排和囊泡聚集;添加維生素B等成分可進一步提升外泌體在常溫下的穩定性;保護劑濃度需根據外泌體來源和特性進行調整,如間充質干細胞來源外泌體凍干保護劑配方為1% - 6%甘露醇與3% - 15%山梨醇組合。
提供外泌體凍干工藝摸索,外泌體凍干工藝開發,外泌體凍干放大生產等。